A、用蒸馏水哺乳动物成熟的红细胞，使红细胞吸水涨破，然后通过过滤获得较纯净的细胞膜，A正确；B、同细胞器的重量不同，可以用差速离心法分离各种细胞器，B正确；C、观察线粒体利用健那绿染液将线粒体染成蓝绿色，再用显微镜观察，C错误；D、用放射性同位素标记法追踪氨基酸的转移途径进而研究分泌蛋白的合成过程，...D正确．故选：C．