请专家详细解释：SRY-PCR胚胎的性别鉴定技术

教材上只是简单说出该技术的程序：先从被测胚胎中取出几个细胞，提取DNA，然后用位于Y染色体上的性别决定基因，即SRY基因的一段碱基作引物，用胚胎细胞中的DNA为模板，进行PCR扩增，最后用SRY特异性探针进行检测。出现阳性反应者，胚胎为雄性；出现阴性反应者，胚胎为雌性。我现在想知道：为什么一定要用“SRY基因的一段碱基作引物”来进行PCR扩增呢用SRY基因的一段碱基作引物可以与细胞中的所有DNA退火结合吗？引物不都是特异性的吗？请高手能够深入浅出的解释一下，一定追加分数。解释的时候可以不参考我提出的问题来说明，而是就技术本身去说。高手路过一定要帮忙哦。

匿名用户 2009-06-23 14:35

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题目中的原意就是，如果是男的，就有Y染色体，和上面的性别决定基崭剪狼因这样的话，加入了它的引物，找到原来的模急慕板，再做PCR，这个性别基因就会次宰被复制扩充于是就可以用探针技术被检测到是女的就不会有上述反应了整个过程和其它的所有常染色体没有任何关系的，有没有它们都是一样的，反正不会参与到PCR里面来，没有引物的（你所说的特异性） “用胚胎细胞中的DNA为模板”，意思其实和“用胚胎细胞中的性染色体DNA为模版”是一样的所以不可以全部都退火结合还有问题吗？

匿名用户 2009-06-23 15:03

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其他回答

1、之所以选SRY基因是因为它对于睾丸发育十分重要，因为存在着XY女性和XX男性，也就是说有这个基因才是男的，而非只要有Y染色体上任一个基因就是男的。在作性别鉴定时还有选位于Y染色体上的DYZ1重复序列为模板的检测方法。当模板数太少时可能会产生假阳性或假阴性结果，但也不能从胚胎中取太多的细胞。所以选...择DYZ1时，一个细胞就可以相当多个细胞。 2、PCR虽然号称是特异性扩增，但这是一种最容易产生假阳性的方法，也就是所说的“非特异性扩增”，也就是说其也可能与非特异的位点结合，当然扩增产物比例较少。用荧光定量的方法来检测时，一般不用SYBR法，而是用探针法来检测就是为了增加检测的特异性。可以这样理解，此引物扩增出的产物是包括特异性产物、非特异性产物及引物二聚体的混合后，而探针只探特异性的产物，从而得到准确的结果。

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匿名用户 2009-06-27 21:27

楼主好奇怪啊~~~ 你自己都说了引物是特异性结合的，也就是和Y染色体上的SRY结合，不和其他染色体结合。所以男性就会PCR出条带来，而女性就P不出来啊。哪里不对了？

检星火_cfHO 2009-06-23 14:57