马里奥？卡佩基等科学家在胚胎干细胞和哺乳动物DNA重组方面的研究中取得一系列突破性发现，这些发现导致了

马里奥?卡佩基等科学家在胚胎干细胞和哺乳动物DNA重组方面的研究中取得一系列突破性发现，这些发现导致了“基因敲除”技术（通常叫基因打靶）的出现，利用这一技术可以准确地“敲除”DNA分子上的特定基因，该技术的过程大致如下：第一步：分离胚胎干细胞．从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞，在培养基中扩增．这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”．第二步：突变DNA的体外构建．利用基因工程技术在含靶基因的DNA片段上插入neoR基因（新霉素抗性基因），使该片段上的靶基因失活．第三步：突变DNA与靶基因互换．将体外构建的突变DNA转移入胚胎干细胞，再通过同源互换，用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个，完成对胚胎干细胞的基因改造．第四步：将第三步处理后的胚胎干细胞，转移到特定培养基中筛选培养．其基本原理如图所示：请根据上述资料，回答下列问题：（1）第一步从小鼠囊胚的______部位，获得胚胎干细胞．（2）第二步若将靶基因只用一种限制酶敲除，则该DNA片断中应用______个酶切位点，再用DNA连接酶将敲除后的若干DNA片断进行连接，得到的重组DNA有______种类型．若用一种限制酶将靶基因敲除后，再插入neoR基因，则体外构建的突变DNA有______种类型．（3）第四步的特定培养基中必须加入物质______，该培养基为______培养基．（4）研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞，若将该细胞培育成基因敲除小鼠，运用到的生物技术有______、______．（5）科学家可以通过敲除基因来研究基因的功能，第（4）题中获得的基因敲除小鼠，能否直接用来研究基因的功能？______；为什么？______．
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匿名用户    2015-02-01 20:20    

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（1）囊胚包括内细胞团和滋养层，其中内细胞团细胞，具有发育的全能性，属于胚胎干细胞． （2）若将靶基因只用一种限制酶敲除，则靶俗祸基因两侧应各有一个酶切位点．用用1表示靶基因前的基因、2表示靶基因、3表示靶基因后的基因，用DNA连接酶将敲除后的若干DNA片断进行连接时，可得到3种类型的重组DNA，即1和2连接形成的重组DNA、2和3连接形成的重组DNA、1和3连接形成的重虏躬组DNA．若用一种限制酶将靶基因敲除后，再插入neoR基因，由于只有重组DNA1和2、重组DNA2和3中含有靶基因，所以体外构建的突变DNA有2种类型． （3）第四步的特定培养基中必须加入物质新霉素，该培养基为选择培养基，用以选择成功“敲除”一蛇吊荒个靶基因的胚胎干细胞． （4）将“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞培育成基因敲除小鼠，需要运用动物细胞培养、胚胎移植等技术． （5）因为该基因敲除小鼠只敲除了一个基因，还有一个基因会行使功能，因此无法判断此基因的功能，所以不能用获得的基因敲除小鼠来直接研究基因的功能．故答案为：（1）内细胞团　（2）2　3　2　（3）新霉素　选择　（4）胚胎移植　动物细胞培养（5）不能　该基因敲除小鼠只敲除了一个基因，还有一个基因会行使功能，因此无法判断此基因的功能

匿名用户   2015-02-01 20:29
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